食品安全国家标准GB 5009.255-2016 是关于食品中果聚糖的测定标准,2016年08月31日发布,2017年03月01日实施。本标准适用于乳及乳制品、婴幼儿配方食品、婴幼儿谷类辅助食品、固体饮料、配制酒中单独添加的低聚果糖、多聚果糖或菊粉含量的测定。本标准规定了食品中果聚糖含量的离子色谱法测定方法。
食品安全国家标准食品中果聚糖的测定标准GB 5009.255-2016是由中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发布于2016年08月31日,2017年03月01日实施。本标准适用于乳及乳制品、婴幼儿配方食品、婴幼儿谷类辅助食品、固体饮料、配制酒中单独添加的低聚果糖、多聚果糖或菊粉含量的测定。本标准规定了食品中果聚糖含量的离子色谱法测定方法(范围、原理、试剂和材料、仪器和设备、分析步骤、分析结果的表述、精密度及其他的)。
1、范围
本标准规定了食品中果聚糖含量的离子色谱法测定方法。
本标准适用于乳及乳制品、婴幼儿配方食品、婴幼儿谷类辅助食品、固体饮料、配制酒中单独添加的低聚果糖、多聚果糖或菊粉含量的测定。
2、原理
试样经热水浸提,样液中的蔗糖经蔗糖酶水解成葡萄糖和果糖,葡萄糖和果糖经硼氢化钠还原成相应的糖醇,多余的硼氢化钠用乙酸中和。样液中的果聚糖经过果聚糖酶水解成果糖和葡萄糖,经离子色谱-脉冲安培检测器测定果糖含量,通过换算系数,折算得到果聚糖的含量。
3、试剂和材料
3.1、试剂
除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。
3.1.1、氢氧化钠(NaOH)
3.1.2、马来酸(C4H4O4)
3.1.3、蔗糖酶:来源于酵母,酶活力≥300U
3.1.4、硼氢化钠(NaBH4)
3.1.5、冰乙酸(CH3COOH)
3.1.6、三水乙酸钠(CH3COONa·3H2O)
3.1.7、果聚糖酶:来源于黑曲霉,酶活力≥10000U
3.1.8、50%氢氧化钠溶液(NaOH):色谱纯
3.1.9、无水乙酸钠(CH3COONa):纯度≥99.0%
3.1.10、氮气(N2):纯度≥99.9%
3.2、试剂配制
3.2.1、氢氧化钠溶液(1mol/L):称取40g氢氧化钠(精确至0.01g),溶于水并稀释至1000mL,室温下可放置2个月。
3.2.2、马来酸钠缓冲溶液(100mmol/L,pH6.5):称取1.16g马来酸(精确至0.01g)于150mL烧杯中,加入约70mL水溶解,用1mol/L氢氧化钠溶液调节pH6.5,用水稀释至100mL。4℃保存,可放置3个月。
3.2.3、蔗糖酶溶液(4.5U/mL):将蔗糖酶(活力为300U)溶解于66mL马来酸钠缓冲溶液,分装到2mL的离心管中,-20℃保存,可放置6个月。使用前需测定酶活力。
3.2.4、氢氧化钠溶液(50mmol/L):称取2g氢氧化钠(精确至0.01g),溶于水并稀释至1000mL,室3.2.5硼氢化钠溶液(10mg/mL):准确称取适量硼氢化钠(精确至0.001g)于聚丙烯离心管中,用50mmol/L氢氧化钠溶液溶解,最终质量浓度为10mg/mL,用时现配。
3.2.6、乙酸溶液(200mmol/L):吸取0.6mL冰乙酸,用水稀释至50mL,4℃保存,可放置2个月。
3.2.7乙酸钠溶液(200mmol/L):称取1.36g三水乙酸钠(精确至0.01g),溶于水并稀释至50mL,4℃保存,可放置2个月。
3.2.8、乙酸钠缓冲溶液(pH4.5):吸取14mL乙酸溶液和11mL乙酸钠溶液混合,并用水稀释至50mL,用时现配。
3.2.9、果聚糖酶溶液(455U/mL):将果聚糖酶(活力为10000U)溶解于22mL乙酸钠缓冲溶液,分装到2mL的离心管中,-20℃保存,可放置6个月。使用前需测定酶活力。
3.2.10、氢氧化钠溶液(200mmol/L):取10.4mL50%氢氧化钠溶液,用水稀释至1000mL,通入氮气保护,缓慢摇匀,室温下可放置7d。
3.2.11、氢氧化钠(150mmol/L)乙酸钠(500mmol/L)混合溶液:称取41g无水乙酸钠(精确至0.01g),用约500mL水溶解,0.22μm滤膜过滤,脱气10min,加入7.8mL50%氢氧化钠溶液,并用水
稀释至1000mL,通入氮气保护,缓慢摇匀,室温下可放置7d。
3.3、标准物质
果糖标准物质(C6H12O6):纯度≥99.0%。
3.4、标准溶液的配制
3.4.1、果糖贮备溶液(2000mg/L):准确称取0.05g(精确至0.1mg)80℃烘干至恒重的果糖标准物质
于50mL烧杯中,加入约10mL热水,待果糖溶解后,冷却至室温,用水稀释至25mL容量瓶中,摇匀,
4℃保存,可放置1个月。
3.4.2、果糖中间溶液(80.0mg/L):吸取果糖贮备溶液1mL,用水稀释至25mL容量瓶中,用时现配。
3.4.3、果糖标准曲线工作溶液:取适量果糖中间溶液,用水配制成质量浓度为0.800mg/L、1.60mg/L、
4.00mg/L、8.00mg/L、16.0mg/L的标准曲线工作溶液。
3.5、材料
3.5.1、净化柱:反相固相萃取柱,填料为苯乙烯二乙烯基苯,2.5mL。
3.5.2、微孔滤膜:水相,0.22μm。
以上关于食品中果聚糖的测定标准法规只截取部分内容,想阅读完整版的食品安全国家标准食品中果聚糖的测定GB 5009.255-2016可下载下面附件。